Вестернблот для определения IgG и IgA антител против различных антигенов Yersinia Enterocolitica

Краткое изложение и объяснение теста

Yersiniae является членом рода Enterobacteriaceae.

Выделяют три вида, патогенных для человека:

На основании О-антигена выделяется 34 серотипа Yersinia. Только серотипы, содержащие плазмиды, могут инфицировать человека (в России - 0:9, 0:3, 0:16,  0:5, 27). Касательно путей  передачи заболевания имеются определенные объяснения, однако доказательства отсутствуют.

В большинстве случаев инфицирование Yersinia enterocolitica вызывает мезентериальный лимфаденит с клинической картиной энтерита, псевдоаппендицита, илеита или колита. Тяжесть проявления заболевания зависит от возраста пациента. Экстрамезентериальные формы (20 – 25 % всех случаев), локализованные инфекции после диссеминации, септические формы и лимфаденопатический синдром могут иметь место, как на фоне предшествующего энтерита, так и без него. Сохранение Yersinia enterocolitica в лимфатических узлах и в связанной с кишечником лимфатической ткани, возможно, является причиной хронических и рецидивирующих форм заболевания.

Наиболее частыми вторичными иммунопатологическими проявлениями, вызванными Yersinia, являются реактивный артрит и узловая эритема.

Yersinia-индуцированный реактивный артрит обычно начинается через 1 – 4 недели после начала кишечных симптомов. Однако, важно отметить, что большое количество пациентов не могут сообщить о наличии в анамнезе каких-либо кишечных симптомов до проявления артрита. В большинстве случаев поражаются суставы нижних конечностей. Реактивный артрит обычно продолжается 3 – 12 месяцев, а затем идет на убыль, однако у ряда пациентов заболевание приобретает хронический и рецидивирующий характер, при этом данный реактивный артрит невозможно отличить от других форм спондилоартрита. 60 – 80 % этих пациентов являются положительными по наличию HLA-B27. В большинстве случаев Yersinia-индуцированных артритов в сыворотке крови или синовиальной жидкости определяется наличие персистирующих Yersinia-специфических IgA антител или иммунных комплексов с дальнейшей Yersina-специфической пролиферацией синовиальных лимфоцитов. Персистирование IgA антител обычно сочетается с персистированием патогенных (плазмид-содержащих) штаммов Yersiniae в лимфатической ткани кишечника.

В ряде случаев инфекция Yersina проявляется узловатой эритемой, которая более часто встречается у взрослых женщин и также может сопровождаться реактивным артритом. Кожные симптомы обычно появляются через 4 - 6 после начала инфекции.

Старые серологические методы определения антител к Yersinia основывались на тестах агглютинации. Однако в большинстве при начале артритических симптомов уровень этих агглютининов был ниже определяемого уровня. В то же время пробы кала уже были отрицательными.  Поэтому, в большинстве случаев инфекция Yersinia не диагностировалась. Дополнительная проблема таких старых методов, как реакция Видаля, была перекрестная реактивность с другими грамм-отрицательными бактериями.

Только техника иммуноблотинга с использованием специфических вирулентно-ассоциированных антигенов и определение класса-специфичных антител может помочь ответить на вопрос, где имеется давняя персистирующая инфекция, а где ранняя свежая инфекция Yersinia enterocolitica. Ответ на этот вопрос является очень важным для определения прогноза заболевания и принятия решения о выборе адекватной терапии.

Анализ получаемых на тестовой мембране полосок и интерпретация результатов

Пороговый уровень - Стандарт: IgA - 10 %, IgG - 15 %

Для изготовления данного иммуноблота используется супернатант кальций-дефицитной культуры бактерий Yersinia серовар 0:9. При этих условиях патогенный штамм Yersinia теряет так называемый „Yersinia outer proteins“ (yop) – внешний белок Yersinia или  „release proteins“ (RP) – освобождающий протеин. Эти белки закодированы в плазмиде, они высоко патогенны и высоко специфичны для патогенной человеческой Yersinia. Иммунный ответ в виде образования антител может наблюдаться против следующих белков:

Об это белке практически ничего не известно. Возможно, он вовлечен в активный захват железа бактерией из окружающей среды. Иммунный ответ - IgG антитела.

Этот белок отвечает за способность Yersiniae ингибировать агрегацию тромбоцитов. Иммунный ответ - IgG антитела.

Это белок дает возможность Yersiniae быть резистентной к фагоцитозу. Иммунный ответ - IgG антитела.

Роль этого белка изучена мало. Иммунный ответ - IgG или IgA антитела.

Функция белка дискутабельна. Основное количество IgA антител образуется именно против этого белка, поэтому результаты особенно важны.

Функция этого белка недостаточно ясна. Иммунный ответ - IgA или IgG антитела, однако проявляется очень редко.

Этот белок играет важную роль в цитотоксичности Yersiniae. Иммунный ответ – в основном, IgG антитела.

Этот белок не закодирован в плазмиде, однако является специфичным для Yersinia.

 Интерпретация

IgG

IgA

E-mail: postmaster@westernblot.ru

Вы можете сделать данные тесты www.fides-lab.ru

Тел: 8 (495) 401 05 77

Москва, Алтуфьевское шоссе 9 (Метро Владыкино)